¿Qué son las pruebas de endotoxinas y cuándo es necesario el control de pirógenos?

Más allá de la biofarmacia | Preguntas frecuentes sobre la gelatina farmacéutica

Respuesta corta:Las pruebas de endotoxinas miden la endotoxina bacteriana, un tipo de pirógeno que puede causar fiebre si ingresa al torrente sanguíneo, generalmente mediante la prueba de lisado de amebocitos de Limulus (LAL) o un método actual comparable. El control de pirógenos solo es necesario en contextos específicos, principalmente cuando la gelatina o un material derivado de la gelatina se destina a inyectables, vacunas, productos biológicos u otras aplicaciones estériles; la gelatina para cápsulas y comprimidos orales convencionales normalmente no se controla para detectar endotoxinas, y el requisito aplicable siempre viene definido por el producto terminado y el marco regulatorio vigente.

Pirógenos y endotoxinas: la diferencia fundamental

Un pirógeno es cualquier sustancia que puede causar fiebre al llegar al torrente sanguíneo. La endotoxina bacteriana, un componente de la membrana externa de las bacterias gramnegativas, es el pirógeno más común y estudiado, y es el que generalmente se analiza en las pruebas farmacéuticas. Las endotoxinas son termoestables, por lo que pueden sobrevivir a procesos que eliminan las bacterias; por ello, los materiales que se administrarán por vía estéril o parenteral deben someterse a pruebas en lugar de asumir que están libres de contaminantes.

Por qué el requisito depende de la vía administrativa

El cuerpo humano tolera la endotoxina de forma muy diferente según la vía de administración. El tracto digestivo está expuesto a la endotoxina de forma rutinaria y normalmente la procesa, por lo que las formas farmacéuticas orales, como cápsulas y comprimidos, generalmente no requieren control de pirógenos ni de endotoxinas. La endotoxina se convierte en un atributo crítico de calidad solo cuando un material o su extracto puede llegar al torrente sanguíneo, los tejidos u otros sitios normalmente estériles, como en productos inyectables, formulaciones parenterales, estabilización de vacunas o productos biológicos, y ciertas aplicaciones para el cuidado de heridas o en contacto con tejidos.

Cuando el control de pirógenos o endotoxinas se aplica a la gelatina

• Formas farmacéuticas inyectables o parenterales- Si la gelatina aparece en una formulación inyectable, el excipiente normalmente debe cumplir con un requisito de endotoxinas establecido para ese producto.
• Vacunas y productos biológicos- La gelatina utilizada como estabilizador en productos administrados por inyección se controla conforme a las especificaciones del producto terminado.
• Aplicaciones estériles y médicas- Ciertos usos en contacto con tejidos, implantes o dispositivos pueden requerir materiales con bajo contenido de endotoxinas.
• Grados especializados no gelificantes- Las gelatinas hidrolizadas o no gelificantes para cultivo celular o usos similares se suministran a veces con bajo contenido de endotoxinas, nuevamente solo cuando la aplicación lo requiere.

La gelatina farmacéutica convencional para cápsulas, comprimidos y otras formas farmacéuticas sólidas orales no suele estar sujeta a límites de endotoxinas, ya que el producto terminado no requiere tal limitación.

Métodos de prueba comúnmente utilizados

Cuando se requiere una prueba de endotoxinas, la elección del método se basa en la farmacopea vigente y la monografía del producto. El método más conocido es la prueba de lisado de amebocitos de Limulus (LAL), que utiliza un lisado de células sanguíneas de cangrejo herradura y reacciona a la endotoxina con una respuesta de coagulación o color medible. Los ensayos de factor C recombinante y la prueba de activación de monocitos (MAT) son opciones más recientes, y la prueba de pirógenos de conejo mide la respuesta febril directamente, en lugar de solo la endotoxina. Los resultados se expresan normalmente en unidades de endotoxina, por ejemplo, por gramo o por miligramo de material, según la especificación acordada.

Qué buscar en un COA

Si su producto requiere realmente una gelatina con bajo contenido de endotoxinas, solicite al proveedor un grado con certificación de bajo contenido de endotoxinas y verifique que el certificado de análisis indique el resultado de endotoxinas, el método empleado y el límite de referencia. Si su producto es una cápsula o tableta oral, no dé por sentado que un certificado para uso alimentario o en cápsulas requiere una línea de endotoxinas; del mismo modo, no asuma que un certificado para cápsulas sea adecuado para un uso inyectable. Ante cualquier duda, confirme el requisito con su equipo de control de calidad o de regulación antes de especificar el grado.

Lecturas relacionadas

Para obtener una visión más amplia, consulteCómo leer una especificación de gelatina farmacéutica (COA)y¿Qué límites microbianos se aplican a la gelatina farmacéutica?.